产品介绍
本产品是专为两步法 RT-PCR 第一步实验配制的 cDNA 第一链合成试剂盒。该试剂盒中使用的ARScript 逆转录酶是 M-MLV 由来的新型高效逆转录酶,新颖突变位点大幅提升酶的转录活性,cDNA 第一链合成的效率和产量更高,可利用 pg 级的总 RNA 或 mRNA 合成 cDNA 第一链。点突变消除 RNase H活性,酶的延伸性能提高,有效改善逆转录酶与 RNA 模板的亲和力,可获得长至 12 kb 的 cDNA。精心优化的 RT Buffer 使逆转录酶应用范围更广,对后续的 PCR 以及定量 PCR 实验兼容性高。该试剂盒配备所有逆转录试剂,使用简单方便。适用于第一链 cDNA 的合成和后续的 RT-PCR、RT-qPCR,以及全长 cDNA文库的构建等。
产品特点
1. 高效的逆转录效率:新颖突变位点大幅提升酶活性能,获得更高产量的 cDNA。
2.良好的延伸能力:点突变消除 RNase H 活性,改善逆转录酶与 RNA 模板的亲和力,可获得长至 12 kb的 cDNA。
3. 灵敏度高:可利用 pg 级的总 RNA 或 mRNA 模板合成 cDNA 第一链。
4. 使用方便:逆转录试剂盒中已配备所有逆转录试剂,仅需准备模板即可轻松完成逆转录。
保存条件
-20℃保存,有效期1年。
注意事项
1. 在操作过程中应避免 RNase 污染,防止 RNA 降解或实验中的交叉污染,建议在专门的区域进行 RNA操作,使用专门的仪器和耗材,操作人员带口罩和一次性手套并经常更换手套。
2. 实验尽量使用一次性塑料器皿,若使用玻璃器皿,应使用 0.1%DEPC(焦碳酸二乙酯)水溶液在 37℃处理 12 小时,并在 120℃下高压灭菌 30 分钟后使用,或者将玻璃器皿在 180℃下干热灭菌 60 分钟后使用。实验中用到的无菌水应使用 0.1%的 DEPC 处理后进行高压灭菌。
3. 本试剂盒中的所有试剂使用前请上下颠倒轻轻混匀,尽量避免起泡,并经短暂离心后使用。所涉及的酶类使用后应尽快放回-20℃,避免反复冻融。
4. 若起始 RNA 的量小于 50 ng,建议加入 RNA 酶抑制剂(RNasin)。