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Edu-488细胞增殖检测试剂盒

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Item number Pseudolaric acid Purity/Specification Unit Product Offer Discounted price (¥) Stockpile Quantity Purchased Add to Shopping Cart
RC0051M Edu-488细胞增殖检测试剂盒 50-500次 ¥650
Item number RC0051M
Purity/Specification 50-500次
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产品介绍

AR EdU-488 细胞增殖检测试剂盒是一种利用核苷渗入法对细胞增殖情况进行快速、简单、高灵敏检测的试剂盒。其原理为:试剂盒中的 EdU(5-ethynyl-2' -deoxyuridine)是一种胸苷(T)类似物,EdU 可以在在细胞周期的 S 期中替代胸苷掺入到新合成的 DNA 中;另一方面,EdU 上的乙炔基能与叠氮化物(如荧光探针 Alexa Fluor 488 Azide)通过 Cu+的催化发生共价反应,形成稳定的三唑环,该反应非常迅速,被称作点击反应(Click reaction) 。通过点击反应,新合成的 DNA 会被绿色荧光标记,然后通过检测荧光信号实现细胞增殖的检测。


产品特点

1.安全:无放射性污染。

2.简单:简单高效,仅需三步:EdU 孵育;细胞固定;荧光检测。

3.快速:无需过夜,省却抗原抗体反应。整个检测过程只需 2.5 小时,大大缩短实验周期。

4.准确:标记率高且无需 DNA 变性,可有效避免变性带来的样品损伤。

5.灵敏:检测染料仅为 BrdU 抗体的 1/500,更容易扩散,即使单个增殖细胞也能准确检测。

6.兼容:允许与多种抗体或荧光蛋白同时标记,能够同时检测细胞其他性状特征。


保存条件

-20℃保存,一年有效。

488-Azide 和 Hoechst 33342(1000X)须避光保存。


注意事项

1.羟基脲(Hydroxyurea)为 DNA 合成抑制剂,经过 10mM 羟基脲提前 30min 处理的细胞,绿色荧光阳性的细胞几乎完全消失,因此常被用作 EdU 实验的阴性对照。

2..配制好的 Click-iT Additive Solution 请根据每次用量适当分装后-20℃保存,避免反复冻融。Click-iT Additive Solution 融化后有白色物质析出为正常现象,请上下颠倒几次,待全部溶解后使用。溶液一旦呈现棕色,则说明有效成分降解,不能再使用。

3.皂苷促渗液可以用于全血及含红细胞的细胞悬液,以及其他含多种细胞类型的混合细胞悬液的通透。这种促渗液可以在裂解红细胞的同时,维持白细胞的光散射特性。

4.本试剂盒做动物实验时可能需要更多的 EdU,请根据实验需求用合适稀释液稀释后使用。

5.由于本产品涉及到铜离子催化进行点击反应,请注意以下的兼容性问题及解决方案。本产品完全兼容有机类染料如 Alexa Fluor® 系列普通染料及 fluorescein (FITC) 、Allophycocyanin (APC)及 APCE-tandems 染

料;对于 Qdot®纳米晶体探针、Horseradish peroxidase (HRP)、R-phycoerythrin (R-PE) 和 R-PE-tandems 染料如 Alexa Fluor® 680- R-PE 等,需要在点击反应完成后进行反应和检测;本产品会影响 GFP、RFP、mCherry 等荧光蛋白的荧光,对于荧光类蛋白如 GFP、TC-FlAsH™和 TC-ReAsH™类试剂,需要在点击反应前进行反应和检测。Phalloidin (鬼笔环肽)不兼容点击反应,在检测细胞微管时请选用其它探针。

6.如需在传统流式仪上进行总 DNA 含量的检测,可采取低流速检测。DNA 含量检测所用荧光检测信号应与 DNA 含量成线性关系。EdU 标记信号呈现对数放大可以很好的被检测到。

7.为了您的安全和健康,操作时请穿着实验服并佩戴一次性手套。



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